Пути метаболизма аминокислот в организме. Основы метаболизма аминокислот в организме

Метаболический фонд свободных аминокислот является важным показателем обменных процессов. Формируясь за счет поступления из эк-зо- и эндогенных источников, участвуя в ана- и катаболических процессах, он характеризуется относительным постоянством во взрослом организме.

Возникновение и течение беременности вызывает ферментативные и гормональные сдвиги, ведет к изменению всех видов метаболизма, и прежде всего белкового и аминокислотного обменов. Каждое стойкое изменение в метаболическом фонде свободных аминокислот в организме матери отражается на интенсивности процессов синтеза тканевых белков плода, поэтому изучение особенностей обмена свободных аминокислот крови при беременности представляет научно-теоретический и практический интерес [ 112, 113].

Как правило, стойкие и глубокие нарушения метаболических процессов возникают при носительстве беременными женщинами мутантных генов, вызывающих наследственные нарушения обмена. При этом, они проявляются не только у гомозигот, но и у гетерозиготных носителей.

Одним из таких распространенных наследственных аутосомно-рецессивных дефектов обмена аминокислот является фенилкетонурия (ФКУ), которая встречается в России с частотой 1: 8-10 ООО человек. В ее основе лежит генетически детерминированное нарушение реакции гидро-ксилирования фенилаланина (ФЕН) в тирозин (ТИР). Эта реакция осуществляется фенилаланингидроксилазной системой печени (ФАГ - системой), основным ферментом которой является фенилаланин - 4 - гидрокси-лаза (ФАГ). Ген, кодирующий фермент, располагается в длинном плече 12 хромосомы . Все дефекты развития при фенижетонурии обусловлены высокими концентрациями аминокислоты фенилаланин и продуктами ее метаболизма.

В современной научной литературе накоплен большой фактический материал о неблагоприятном влиянии высоких концентраций фени-лаланина в крови матери (гомозиготы по гену ФАГ) на плод при материнской фенижетонурии . Около 1/3 детей, рожденных этими женщинами, страдают олигофренией, сочетающейся с различными аномалиями, не связанными с нарушениями обмена. У них наблюдаются многочисленные дефекты развития: до 12% детей страдают врожденными пороками сердечно-сосудистой системы, до 40% - внутриутробной задержкой роста, до 73% - микроцефалией .

Есть все основания полагать, что гетерозиготное носительство му-тантных генов беременными женщинами может рассматриваться как проявление "материнского эффекта", оказывающего влияние на развитие плода. Имеются сообщения о поражении центральной нервной системы и нарушении процессов внутриутробного развития у детей, не имеющих му-тантных генов фенилаланингидроксилазной системы, но рожденных гетерозиготными по этим генам матерями (Kutter С., 1979).

Декомпенсация скрытого дефекта обмена фенилаланина у матери в первом триместре беременности может приводить к повышению его уровня в сыворотке крови выше 10 мг%. Предполагается, что именно эта временная гиперфенилаланинемия может быть причиной нарушения развития плода .

В доступной научной литературе отсутствуют данные, касающиеся изменений количественного содержания метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови у женщин на различных сроках беременности, полученных с использованием новейших методов биохимического анализа. Не получили должного освещения вопросы комплексной оценки метаболического фонда свободных аминокислот у гетерозиготных носителей гена ФАГ во время беременности. Это, а также научная и медико-социальная значимость проблемы необходимость проведения настоящего исследования. определили

Цель исследования.

Изучить количественное содержание метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови у женщин на различных сроках беременности и оценить связь его вариабельности с уровнем фенилаланина.

Задачи исследования.

1. Изучить количественное содержание свободных аминокислот в сыворотке крови у небеременных женщин в норме и оценить особенности их взаимной вариабельности.

2. Оценить влияние гетерозиготного носительства по генам фенила-ланингидроксилазной системы на состояние метаболического фонда свободных аминокислот.

3. Изучить вариабельность содержания фенилаланина в организме женщин на различных сроках беременности в рамках пилотной программы скрининга.

4. Оценить количественное содержание свободных аминокислот сыворотки крови у женщин на различных сроках беременности в зависимости от уровня фенилаланина.

5. Выявить влияние беременности на изменение метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови у гетерозиготных носителей мутаций гена фенилаланингидроксилазы.

Научная новизна работы.

Впервые, с использованием методов ионообменной хроматографии и многомерного анализа изучено количественное содержание свободных аминокислот сыворотки крови и их взаимное варьирование у небеременных и беременных (на различных сроках) женщин.

В рамках пилотной программы скрининга впервые получены количественные характеристики содержания фенилаланина в крови женщин на различных сроках беременности.

Установлены изменения в состоянии метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови, вызванные развивающейся беременностью, в первом и во втором триместрах.

Доказано влияние гетерозиготного носительства (по гену фенила-ланингидроксилазы) во время беременности на состояние метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови.

Практическая значимость.

Впервые с использованием метода ионообменной хроматографии получены новые данные о количественном содержании свободных аминокислот сыворотки крови у небеременных женщин и на разных сроках физиологической беременности, которые могут рассматриваться в качестве новых нормативов количественного содержания свободных аминокислот в сыворотке крови.

Сведения о вариабельности аминокислотного спектра сыворотки крови больных фенилкетонурией, женщин гетерозиготных носителей мутаций гена фенилаланингидроксилазы во время беременности могут быть использованы в работе медико-генетических консультаций, акушерско -гинекологических служб при осуществлении контроля за течением беременности и состоянием метаболических процессов у беременных.

На основе полученных результатов возможна разработка научно-методических рекомендаций при изучении курсов биохимии, медицинской, клинической и биохимической генетики, акушерства и гинекологии в высшей школе.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Состояние физиологической беременности вызывает у женщин изменения количественного содержания метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови, проявляющиеся в снижении концентраций валина, лейцина, лизина, глицина в первом триместре беременности; фенилаланина, гистидина, цистеина во втором триместре.

2. У женщин, облигатных гетерозиготных носителей мутаций гена фенилаланингидроксилазы (родивших больных ФКУ), в результате нарушения реакции гидроксилирования фенилаланина, имеет место изменение метаболического фонда свободных аминокислот, связанное с увеличением количественного содержания кислых (глутаминовая, аспарагиновая) и нейтральных (треонин, глицин) аминокислот в сыворотке крови.

3. Концентрация фенилаланина в крови беременных женщин, превышающая 1,2 мг%, может рассматриваться как основание для отбора беременных женщин в группу «потенциальных гетерозигот» по мутантному гену фенилаланингидроксилазы.

4. Возникновение и течение беременности у женщин, гетерозиготных носителей мутаций гена фенилаланингидроксилазы, оказывает влияние на состояние метаболического фонда свободных аминокислот. При этом имеет место снижение количественного содержания треонина, глицина, аланина и изолейцина в сыворотке крови.

Апробация работы и публикации.

Материалы диссертационной работы представлялись на конференциях молодых ученых КГМУ (Курск, 1998, 1999) и научных конференциях И преподавательского состава КГПУ (Курск, 1998 и 1999 гг.), Республиканской конференции студентов и молодых ученых медицинских вузов России (Самара, 1999), межкафедральных заседаниях сотрудников КГПУ и КГМУ (Курск, 1999). По материалам диссертации опубликовано 9 работ.

Объем и структура диссертации.

1. Количественный состав аминокислотного спектра сыворотки крови у женщин представлен в большей степени гидрофобными и нейтральными аминокислотами. Среди гидрофобных аминокислот высокое содержание было характерно для аланина (2,56 ± 0,3 мг%), нейтральных - треонина (2,47 ± 0,42 мг%), основных - лизина (2,08 ± 0,26 мг%) и аргинина (1,93 ± 0,23 мг%).

2. Физиологическая беременность ведет к изменениям метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови: в первом триместре беременности наблюдается снижение количественного содержания валина (0,92 ± 0,12 мг%), лейцина (0,70 ± 0,14 мг%), лизина (1,03 ± 0,20 мг%), глицина (0,66 ± 0,12 мг%); во втором - фенилаланина (0,6 ± 0, 04 мг%), гистидина (1,65 ± 0,18 мг%) и цистеина (0,87 ± 0,09 мг%).

3. Облигатное гетерозиготное носительство мутации гена фенилала-нингидроксилазы (матери, родившие детей, больных фенилкетонурией), в сравнении с женщинами, имеющими неизмененный ген, ведет к нарушениям фонда свободных аминокислот, проявляющимся в увеличении количественного содержания глутаминовой (1,34 ± 0,47 мг%) и аспарагиновой кислот (0,47 ± 0,04 мг%), треонина (4,59 ± 0,44 мг%), глицина (2,04 ± 0,19 мг%). При этом, увеличение количественного содержания глутаминовой кислоты и треонина ведет к изменениям корреляционных взаимосвязей между ними.

142 женщин в группы «потенциальных гетерозигот» по мутантному гену фенилаланингидроксилазы.

5. При гетерозиготном носительстве мутантного гена фенилаланингидроксилазы во время беременности (по сравнению с беременными, несущими нормальный ген) имеет место увеличение количественной представительности аланина (2,56 ± 0,18 мг%), валина (1,77 ±0,16 мг%), метионина (0,68 ±0,16 мг%), тирозина (0,91 ± 0,16 мг%), фенилаланина (1,21 ±0,24 мг%), и снижение содержания треонина (1,81 ± 0,19 мг%) в сыворотке крови.

6. Развитие беременности у гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы, влечет за собой изменения метаболического фонда свободных аминокислот, проявляющиеся в снижении содержания треонина (1,81 ±0,19 мг%), глицина (0,81 ± 0,07 мг%), аланина и изолейцина (0,43 ± 0,04 мг%) в сыворотке крови по сравнению с соответствующими показателями у небеременных гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Весьма важным показателем обмена бежов является уровень свободных аминокислот в крови и тканях, так называемый метаболический фонд организма. Этот запас аминокислот образуется в результате усвоения пищевых бежов, в процессе распада и обновления протеинов органов и тканей . Свободные аминокислоты играют значительную роль в деятельности живого организма. Они являются материалом для синтеза белка и ряда биологически активных веществ. Некоторые из них выполняют самостоятельные функции в метаболизме: включаются в энергетический обмен, участвуют в реакциях связывания и освобождения аммиака, поддерживают определенное состояние клеточных мембран и регулируют ионное равновесие нервной ткани .

При ряде наследственных заболеваний обмена аминокислот происходят глубокие нарушения в ходе ана- и катаболических процессов, количественное содержание отдельных аминокислот в метаболическом фонде организма существенно изменяется. ФениЖетонурия - наиболее часто встречающееся аутосомно-рецессивное заболевание, обусловленное наследственным дефектом фенилаланингидроксилазы, приводящее при отсутствии своевременной терапии к тяжелой умственной неполноценности, составляя около 1% контингента всех умственно отсталых больных . Обнаруживается у одного из 10 ООО новорожденных. Все аномалии развития при фенижетонурии обусловлены высокими концентрациями фенилаланина и накоплением его метаболитов в тканях и биологических жидкостях.

В течение беременности у гетерозиготных носителей фенижетонурии может происходить декомпенсация скрытого дефекта, которая вызывает стойкое повышение концентрации аминокислоты в крови . Следовательно, изучение особенностей метаболизма свободных аминокислот сыворотки крови у женщин во время беременности представляет теоретический и практический интерес, так как каждое функциональное изменение в белковом обмене матери отражается на ходе эмбриогенеза. Условия созревания плода, биохимические превращения в развивающемся организме в значительной степени определяют его состояние в последующие периоды жизни.

В современной научной литературе накоплен большой фактический материал, свидетельствующий о патогенном влиянии гиперфенилаланине-мии матери на развивающийся плод. Об этом свидетельствуют данные, полученные Блюминой М.Г. (1972), Koch R. и соавтр. (1986), Fish и соавтр. (1993), Hyanek J. и соавтр. (1996) при изучении случаев материнской фе-нилкетонурии. Несмотря на довольно широкое изучение проблемы, в научной литературе не получили должного освещения вопросы, связанные с изучением вариабельности содержания фенилаланина у женщин на различных сроках беременности и ее взаимосвязи с другими показателями аминокислотного спектра; отражающие количественное содержание свободных аминокислот в сыворотке крови у щгерозиготных носителей фе-нижетонурии во время беременности, а так же возможные пути выявления носительства мутантного гена с использованием современных биохимических методов.

Изложенные факты определили цель настоящей работы: изучить количественное содержание метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови у женщин на различных сроках беременности и оценить связь его вариабельности с уровнем фенилаланина в крови.

В процессе исследования решались следующие задачи:

1. Изучалось количественное содержание свободных аминокислот в сыворотке крови у небеременных женщин и оценивались особенности их взаимной вариабельности.

2. Оценивалось влияние гетерозиготного носительства по генам фе-нилаланингидроксилазной системы на состояние метаболического фонда свободных аминокислот.

3. Изучалась вариабельность содержания фенилаланина в организме женщин на различных сроках беременности в рамках пилотной программы скрининга.

4. Оценивалось количественное содержание свободных аминокислот сыворотки крови у женщин на различных сроках беременности в зависимости от уровня фенилаланина

5. Выявлялось влияние беременности на изменение метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови у гетерозиготных носителей мутаций гена фенилаланингидроксилазы.

Материалом исследования послужили образцы цельной крови 4739 беременных женщин, прошедших через пилотную программу скрининга.

Аминокислотный спектр сыворотки крови изучался у 72 беременных с уровнем ФЕН в крови, равным или ниже 1,1 мг%; 70 беременных женщин с уровнем фенилаланина в крови, равным более 1,2 мг%; 23 небеременных женщин, в возрасте от 16 до 42 лет; 19 гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы во время беременности; 10 девушек, больных ФКУ, и их матерей. Всего по комплексной программе обследовано 204 человека.

Методы, использованные в настоящей работе, были адекватны поставленным задачам. В исследовании применялись биохимические методы: флюорометрическое определение уровня фенилаланина в цельной крови с использованием прибора «Р1иегоБсош И» (Финляндия), автоматическое определение аминокислотного спектра сыворотки крови методом ионообменной колоночной хроматографии на автоматическом анализаторе «АттосИгот -И» (Венгрия); генеалогический метод и метод анкетирования. Математическая обработка материала наряду с общепринятыми методами, включала применение методов многомерной статистики: кластерного и дискриминантного анализа.

Первоначальной задачей настоящей работы являлось изучение количественного содержания свободных аминокислот сыворотки крови у небеременных женщин и оценка их корреляционных взаимосвязей с использованием современных методов биохимического и математического анализа. Были обследованы 23 женщины (доноры) в возрасте от 19 до 37 лет. Качественный состав аминокислотного спектра сыворотки крови у всех женщин изучаемой выборки характеризовался выявлением на хромато-граммах 16 свободных аминокислот (разрешающая возможность прибора).

Соотношение заменимых и незаменимых аминокислот в сыворотке крови небеременных женщин существенно различалось между собой и составляло 38% для заменимых и 62% для незаменимых аминокислот. Было установлено, что представительность гидрофобных и нейтральных аминокислот составляет в совокупности 71% от всех изучаемых аминокислот. Низким содержанием в сыворотке крови характеризовались кислые аминокислоты - аспарагиновая и глутаминовая (4%).

В результате проведенного сравнительного анализа показателей количественного содержания свободных аминокислот в сыворотке крови, определенных методом ионообменной хроматографии, и данных распределительной хроматографии на бумаге, полученных в 70-х годах отечественными исследователями , выявлены различия в содержании треонина, глутаминовой кислоты, аланина, лизина и аргинина. Полученные закономерности носили достоверный характер. Выявленные различия в результатах исследований могут быть связаны с более эффективным и современным методом выделения и количественного определения аминокислот, точной математической обработкой экспериментальных данных, примененными в нашей работе.

Многомерный анализ позволил определить и оценить степень и характер корреляционных взаимосвязей между количественным содержанием свободных аминокислот в сыворотке крови у небеременных женщин.

Максимальный уровень сопряженности отмечен между количественным содержанием изолейцина и метионина в сыворотке крови. ИЛЕ и МЕТ являются незаменимыми аминокислотами и поступают в организм человека с пищей. В результате их расщепления может образовываться ас-партат и другие промежуточные продукты, используемые в цикле лимонной кислоты для синтеза сукцинил-8-СоА и ацетил- Б-СоА . Высокая степень корреляционных взаимосвязей, отмечена между ФЕН и ТИР, СЕР и ТРЕ, и обусловлена их структурно-функциональными особенностями, участием в метаболизме белков и необходимостью постоянного обновления аминокислотного фонда организма человека за счет образования заменимых аминокислот из незаменимых, поступающих с пищей.

Фенилаланин является незаменимой аминокислотой, но его высокий уровень в тканях и плазме крови оказывает неблагоприятное воздействие на организм человека. Нами оценивались количественные показатели аминокислотного спектра сыворотки крови у десяти девушек, больных фенилкетонурией (пробандов), и их матерей, которые являются облигат-ными гетерозиготными носителями мутации гена фенилаланингидрокси-лазы. Уровень фенилаланина в крови пробандов характеризовался высокими значениями и варьировал в широких пределах, что обусловлено степенью тяжести заболевания и характером его клинического проявления. Выявленные закономерности согласуются с литературными данными .

Количественное содержание ФЕН в сыворотке крови больных ФКУ (8,04 мг%) почти в семь раз превысило идентичный показатель у матерей (1,25 мг%). Установлено, что высокое содержание фенилаланина у больных фенижетонурией связано с низкой концентрацией нейтральной аминокислоты - треонина.

При анализе стандартных статистик выявлено достоверное увеличение количественного содержания кислых (глутаминовой кислоты в два раза) и нейтральных аминокислот в группе облигатных гетерозиготных носителей по мутации гена ФАГ, в сравнении с контрольной выборкой женщин. Вероятно, что в результате увеличения количественного содержания фенилаланина и тирозина в организме гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ, обусловленного нарушением процесса гидроксилирования ФЕН в ТИР, может происходить повышение количественного содержания глутаминовой кислоты. Повышение концентрации треонина может вызывать повышение уровня глицина в сыворотке крови.

Проведенный многомерный анализ показал, что в группе гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ отмечена сопряженность содержания глутаминовой кислоты и треонина в сыворотке крови. Таким образом, увеличение количественного содержания глутаминовой кислоты и треонина у облигатных гетерозигот по мутации гена ФАГ, обусловливает нарушение корреляционных взаимосвязей между этими аминокислотами и изменение метаболического фонда свободных аминокислот сыворотки крови. Вероятно, что у гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ из-за нарушения одного звена обмена, происходит его декомпенсация за счет образования ацетил-СоА для цикла лимонной кислоты (через пируват) из глицина, треонина, аспарагиновой и глутаминрвой кислот.

Уровень фенилаланина в сыворотке крови матерей пробандов составил 1,25 ± 0,12 мг% и был принят как основание для отбора женщин в отдельную группу «потенциальных гетерозигот» при проведении скрининга на гетерозиготное носительство фенилкетонурии. Концентрацию ФЕН, равную или ниже 1,1 мг%, использовали как норму содержания ФЕН в крови.

С 01.01.1997 г. по 01.01.1998 г. в рамках пилотной программы скрининга на базе МГК ОКБ №1 г. Курска проводилось изучение количественного содержания фенилаланина в крови женщин на различных сроках беременности. Уровень аминокислоты определялся у всех беременных женщин г. Курска, ставших на учет в женскую консультацию, в каждом триместре. Концентрацию ФЕН в цельной крови женщин определяли натощак (более 12 часов после еды). По программе скрининга было обследовано 4739 беременных женщин в возрасте от 14 до 48 лет.

Концентрация фенилаланина в крови беременных женщин варьировала в пределах от 0,1 до 3,7 мг%: максимальная наблюдалась в третьем триместре (0,65 ± 0,01 мг%), а минимальная - во втором триместре беременности (0,61 ± 0,01 мг%). Достоверное снижение концентрации ФЕН отмечено во втором триместре беременности по сравнению с первым.

Уровень фенилаланина в крови, равный или превышающий 1,2 мг% наблюдался у 2,3 % всех беременных, проходивших через скрининг.

В результате проведенного скрининга из числа беременных женщин, проходивших через скрининг, были сформированы две группы в зависимости от уровня фенилаланина в цельной крови:

1) Первую группу сформировали из 89 беременных женщин, у которых концентрация фенилаланина в крови превышала или составляла 1,2 мг%, как минимум при двух измерениях. По результатам молекулярно-генетической диагностики у 19 женщин из этой группы было выявлено гетерозиготное носительство мутации R408W 12 экзона гена ФАГ.

2) Вторая группа представляла выборку из 73 беременных женщин, у которых уровень фенилаланина не превышал 1,1 мг% в каждом триместре беременности. В результате ДНК-диагностики у одной женщины из этой группы было выявлено гетерозиготное носительство мутации R408W 12 экзона гена ФАГ.

Для решения задач исследования проведен сравнительный анализ количественного содержания свободных аминокислот у беременных второй группы и небеременных женщин (доноров). Установлено, что количественное содержание ряда свободных аминокислот в сыворотке крови беременных женщин по сравнению с их уровнем у небеременных снижается: в первом триместре беременности отмечено снижение концентраций глицина, валина, лейцина и лизина; во втором - уменьшение фенилаланина, гистидина, цистеина и увеличение метионина по сравнению с первым. Наблюдаемые различия достоверны. Основной причиной выявленной вариабельности количественных показателей аминокислот в сыворотке крови женщин при беременности, по сравнению с небеременными, может являться увеличение интенсивности аминокислотного метаболизма в организме матери вследствие процессов гисто- и органогенеза.

Количественные показатели аминокислотного спектра сыворотки крови беременных женщин, полученные нами, согласуются с литературными данными других исследователей , полученными методом хроматографии на бумаге. Данные, полученные в результате нашего исследования с применением ионообменной колоночной хроматографии, можно рекомендовать в качестве корректных стандартных показателей аминокислотного спектра сыворотки крови у небеременных женщин и во время беременности.

Для изучения взаимосвязи содержания свободных аминокислот от уровня ФЕН в крови был проведен сравнительный анализ между первой и второй группами. В результате было выявлено увеличение количественной представительности нейтральных и гидрофобных аминокислот в сыворотке крови у женщин с уровнем ФЕН в крови, равным или превышающим 1,2 мг%, по сравнению со второй группой беременных (ФЕН ниже или равен 1,1 мг%).

Во втором триместре беременности нами отмечено уменьшение уровня гистидина (почти в два раза) у беременных женщин с содержанием фенилаланина в крови, равным или более 1,2 мг%, по сравнению со второй группой (0,97 ± ОД 6 мг% и 1,65 ± 0,18 мг%, соответственно). Известно, что токсическое действие фенилаланина и недоокисленных продуктов его метаболизма может вызывать дефицит ряда основных аминокислот .

Аминокислотный спектр сыворотки крови у беременных женщин двух рассматриваемых выборок отличался не только по количественному содержанию отдельных аминокислот, но и по характеру их взаимного варьирования. Вероятно, более высокие концентрации глутаминовой кислоты, аланина, валина, метионина, лейцина, тирозина и фенилаланина влияют на степень и характер варьирования всех количественных показателей аминокислотного спектра у беременных женщин первой группы по сравнению со второй.

В рамках проводимого исследования проведено изучение количественного содержания свободных аминокислот в сыворотке крови гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ во время беременности. Полученные данные позволяют утверждать, что гетерозиготное носительство мутации гена фенилаланингидроксилазы проявляется у женщин во время беременности повышением количественной представительности фенилаланина в крови, которая, однако, не превышает установленных норм. У беременных женщин, гетерозиготных по мутации гена ФАГ, средний уровень ФЕН в сыворотке крови составил 1,21 ± 0,24 мг%.

Закономерности варьирования содержания фенилаланина у беременных гетерозигот по гену ФАГ, выявленные нами в результате настоящего исследования, согласуются с ранее полученными данными других авторов, но характеризуются более низкими значениями . Полученные значения содержания фенилаланина в крови могут быть использованы в качестве нормативных показателей при проведении массового обследования беременных женщин на гетерозиготное носительство фенил-кетонурии. Концентрацию ФЕН в крови, равную или выше 1,2 мг%, можно рассматривать как показание для включения беременной женщины в группу «потенциальных гетерозигот» для дальнейшего проведения моле-кулярно-генетической диагностики.

Сравнительный анализ аминокислотного спектра сыворотки крови у гетерозиготных носителей ФКУ во время беременности, в отличие от второй группы (беременные с уровнем ФЕН в крови, равным или ниже 1,1 мг%), выявил снижение концентрации треонина и увеличение - аланина, валина, метионина, фенилаланина и тирозина. Следовательно, у гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы во время беременности, как и у больных фенилкетонурией (глава 4), наблюдается повышенный уровень фенилаланина в сыворотке крови и низкая концентрация нейтральной аминокислоты - треонина.

Проведен сравнительный анализ стандартных статистик количественного содержания свободных аминокислот у женщин, гетерозиготных носителей мутации гена фенилаланингидроксилазы во время беременности и матерей, родивших детей больных ФКУ. Отмечено снижение уровня треонина, глицина, аланина и изолейцина в сыворотке крови у беременных гетерозигот по сравнению с облигатными гетерозиготами.

При этом, анализ дендрограммы матрицы множественных корреляций количественного содержания свободных аминокислот в сыворотке крови беременных гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ выявил сопряженность концентраций треонина и метионина, глицина и серина, аланина, валина, лейцина и изолейцина. Треонин является предшественником глицина, серина, значит, уменьшение количественного содержания треонина в сыворотке крови может обусловливать и снижение концентрации глицина. Изолейцин, лейцин, аланин участвуют в синтезе ацетил-СоА. Кроме того, изолейцин, валин и метионин являются предшественниками сукцинил - Со А, используемого в цикле лимонной кислоты .

Таким образом, аминокислотный спектр сыворотки крови беременных женщин, гетерозиготных носителей мутации гена ФАГ, отличается от спектра облигатных гетерозигот как по количественному содержанию ряда нейтральных и гидрофобных аминокислот, так и по характеру их корреляционных взаимосвязей. Подобные изменения аминокислотного спектра могут зависеть от следующих причин: во-первых, во время физиологической беременности происходит снижение концентраций свободных аминокислот в сыворотке крови (глава 3); во-вторых, у облигатных гетерозигот, выносивших и родивших гомозигот (детей, больных ФКУ) декомпенсация скрытого генетического дефекта происходила во время беременности и, вероятно, высокие концентрации ФЕН в крови развивавшегося плода вызвали деформацию всего метаболизма аминокислот и в организме матери.

У гетерозиготных носителей фенилкетонурии в двух рассматриваемых выборках нарушение обмена фенилаланина сопряжено с вариабельностью количественного содержания нейтральных (треонин, глицин) и гидрофобных (аланин, изолейцин) аминокислот. Учитывая, что многие авторы в своих классификациях относят аланин, валин, лейцин и изолейцин к нейтральным аминокислотам, можно говорить только о взаимозависимости нейтральных и ароматических аминокислот при фенилкетонурии и ее гетерозиготном носительстве.

Таким образом, результаты проведенного биохимического исследования показали, что применение современных методов исследования (флюорометрии и ионообменной хроматографии), позволяет значительно уменьшать процент ошибки при определении, фенилаланина в крови и получать более точные значения количественного содержания аминокислоты в крови. Установленные количественные показатели аминокислотного обмена можно рекомендовать в качестве корректных стандартных для проведения массового обследования беременных женщин на содержание фенилаланина в крови с целью выявления гетерозиготного носительства, пренатальной диагностики ФКУ и внедрения их в практику медико-генетического консультирования.

1. Абросимова Н. А., Барашнев Ю.И., Сиванова Л. А., Некрасова И.И. Модификация метода микробиологического определения аминокислот в крови и моче// Лаб. дело 1974.- № 4.- С. 232-235.

2. Азизян А.Л. Изменение обмена аминокислот при некоторых наследственных заболеваниях у детей с синдромом слабоумия. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. мед. наук.-М., 1971.- 24 с.

3. Анисимов A.A. Основы биохимии.- М.: Высшая школа, 1986.1. С. 299.

4. Анненков Г.А. Генетическая гетерогенность фенижетонурии// Вопр. мед. химии,- 1982.- Т. 28, № 3.- С. 62-70.

5. Аненнков Г.А., Сафронов Е.Е., Розовский И.С., Бахарев В.А. О возможности пренатальной диагностики фенилкетонурии// Акушерство и гинекология. -1981. № 11. - С. 25-27.

6. Афанасьева Ю.И., Юрина H.A. Гистология.- М.: Медицина, 1989.-671 с.

7. Бадалян Л.О. Детская неврология.-М.: Медицина, 1975.-С. 260.

8. Байков А.Д., Ситниченко Е.И. Метод выявления гетерозиготного носительства при фенижетонурии// Лаб. дело. -1973. № 5. - С. 293-295.

9. Баранов B.C. Молекулярная диагностика генных болезней в России: состояние и перспективы// Вестник РАМН.- 1993, № 9.- С. 2731.

10. Барановская С.С. Молекулярно-генетический анализ фенилкетонурии в г. Санкт-Петербурге. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. биол. наук. М., 1996. - 25 с.

11. И. Барановская С.С. Шевцов С.П., Максимова С.П. и соавтр. Спектр мутационных повреждений гена фенилаланингидроксилазы у больных фенилкетонурией г. Санкт-Петербурга// Докл. АН. 1995.-Т. 340.-№5.-С. 709-712.

12. Барашнев Ю.И., Вельтищев Ю.Е. Наследственные болезни обмена веществ у детей. М.: Медицина, 1978. - 318 с.

13. Березов Т.Т., Коровкин Б.Ф. Биологическая химия.-М.: Медицина, 1990.-С. 28-37, 332-368.

14. Бибилейшвили 3. Материалы к клинико-биохимической характеристике беременности, родов и послеродового периода. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. мед. наук. Тбилиси, 1966.- 25 с.

15. Биохимические исследования патологических процессов: сборник статей.- Рига: Зинатне, 1983.- С. 92-97.

16. Биохимия наследственности./ Пер. с япон. Мышкиной С.И.; под. ред. Ларского Э.Г. М.: Медицина, 1979.

17. Блюмина М.Г. Роль гетерозиготных женщин по гену фенилке-тонурии в происхождении спонтанных абортов и нарушениях внутриутробного развития плода.// Генетика. -1972. Т.8. - № 3 - С. 132-138.

18. Блюмина М.Г. Спонтанные аборты у женщин-носительниц гена ФКУ// Акушерство и гинекология. 1972. - № 5. - С. 52-55.

19. Блюмина М.Г. Фенотипический полиморфизм фенилкетонурии (психические и биохимические расстройства) и его возможные причины. Автореф. дис. на соискание уч. степ. док. мед. наук. М., 1973. - 53 с.

20. Блюмина М.Г. Акушерские проблемы фенилкетонурии // Акушерство и гинекология. 1976. - № 12. - С. 54-56.

21. Блюмина М.Г. Уровень фенилаланина в сыворотке крови у ге-терозигот по гену фенилкетонурии в условиях усиленного белкового катаболизма// Генетика. -1981. -Т.Н. №5. - С.910-914.

22. Блюмина М.Г., Ситниченко Е.И., Байков А.Д. К вопросу о генетической гетерогенности фенилкетонурии// Генетика. 1974. - Т. 10. -Вып. 6.-С. 147-155.

23. Блюмина М.Г., Ситниченко Е.И. Концентрация фенилаланина в сыворотке крови больных фенижетонурией при различной тяжести заболевания// Генетика,- 1971.- Т. 7, №4,- С. 143-148.

24. Болезни нервной системы (руководство для врачей), том II.- М.: Медицина, 1995,- С. 275-276.

25. Бохински Р. Современные воззрения в биохимии: Пер. с англ. -М.: Мир 1987.-529 с.

26. Бочков Н.П., Захаров А.Ф., Иванов В.И. Медицинская генетика (руководство для врачей) // АМН СССР. М.: Медицина, 1984.- С. 186-189.

27. Бочков Н.П. Клиническая генетика: Учебник. М.: Медицина, 1997.-288 с.

28. Вельтищев Ю.Е., Ермолаев М.В., Ананенко A.A., Князев Ю.А. Обмен веществ у детей. М.: Медицина, 1983. - 463 с.

29. Видершайн Г.Я. Некоторые проблемы и перспективы в изучении наследственных энзимопатий// Вопр. мед. химии.- 1982. № 3.- С. 22

30. Викторова Т.В., Мурзабаева С.Ш., Карунас A.C. и соавтр. Мо-лекулярно-генетический анализ фенилкетонурии в Башкирии // Генетика. -1997. Т. 33, № 7. - С. 992-995.

31. Второва В.Г., Савченко Т.Н., Мартыш Н.С., Кузнецова JI.B. Особенности бежового и аминокислотного спектра крови матери и плода при сахарном диабете// Педиатрия.-1980.- № 8.- С. 12-15.

32. Высоцкий В.Г., Власова Т.В., Ушаков A.C., Шишкина С.К. Свободные аминокислоты плазмы крови при алиментарной белковой недостаточности у человека//Вопр. питания.- 1974,-№2.-С. 16-20.

33. Глезерман Т. Б., Калмыкова Л.Г. Неврологическое и нейро-психологическое изучение гетерозигот по фенилкетонурии// Труды МНИИ психиатрии МЗ РСФСР.- 1975,- Т. 72.- С. 252-261.

34. Горбунова В.Н., Баранов B.C. Введение в молекулярную диагностику и генотерапию наследственных заболеваний. СПб.: Специальная литература, 1997. - 287 с.

35. Григорьева Н.К. Фенотипические проявления фенилкетонурии у гомо- и гетерозиготных носителей// Генетика человека и патология: Материалы второй итоговой конференции мед. генетиков/ под. ред. В.П. Пузы-рева. Томск: Изд-во Том. Ун-та., 1992.- 246 с.

36. Григорьева Н.К. Проявления гена фенилкетонурии у гетерозиготных носителей. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. мед. наук.- М

37. Дерябин В.Е. Многомерная биометрия для антропологов. М.: Изд-во Московского университета, 1983.-227 с.

38. Диагностика гетерозиготного (скрытого) носительства гена фенилкетонурии в медико-генетических консультациях (методические рекомендации).- М,: МЗ СССР, 1976. -28 с.

39. Дрель И. К. Обмен аминокислот при беременности (обзор литературы)// Вопр. охр. мат. и дет. 1980.- Т. 25, № 5.- С. 51-55.

40. Дьячкова А.Д., Лебедев Б.В. Некоторые показатели обмена фе-нилаланина и тирозина при фенижетонурии у детей// Вопросы охраны материнства и детства. 1969. -Т. 14. - № 7. - С. 29-32.

41. Дьячкова А.Я., Лебедев Б.В. Нарушение обмена фенилаланина при фенилкетонурии// Журнал невропатологии и психиатрии имени С.С. Корсакова 1969. - Т. 69. - Вып 10. - С. 1588-1591.

42. Дьячкова Л.Я., Лебедев Б.В. К вопросу об определении гетерозиготного носительства по гену фенилкетонурии// Педиатрия. 1969. - № 8. - С. 50-53.

43. Дубинин Н.П. Общая генетика. М.: Наука, 1970.- С. 205-206.

44. Дэвини Т., Гергей Я. Аминокислоты, пептиды, белки: Пер. с англ.- М.: Мир, 1976,- С. 173-186.

45. Дюга Г., Пенни К. Биоорганическая химия: Пер. с англ.-М.: Мир, 1983.-С. 26-103.

46. Дюран Б., Оделя П. Кластерный анализ. М.: Статистика, 1977.38 с.

47. Егорова А.И., Аксенова Н.М. Динамика содержания свободных аминокислот в сыворотке крови новорожденных детей с гемолитической болезнью// Вопр. охр. мат. и дет.- 1972,- № 1.- С. 87-88.

48. Зайцева H.A. Формирование метаболического фонда свободных аминокислот тканей человека в раннем онтогенезе. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. биол. наук. Донецк, 1972.- 25 с.

49. Западнкж В.И., Купраш Л.П., Заика М.У., Безверхая И.С. Аминокислоты в медицине. Киев: Здоров"я, 1982.- 200 с.

50. Иващенко Т.Э., Белова Е.Г., Баранов B.C. Простой надежный метод детекции мутации R408W 12-го экзона гена фенилаланингидрокси-лазы в молекулярной диагностике фенилкетонурии// Генетика.-1993.-Т. 29. -№ 5. С. 862-865.

51. Иверла К. Факторный анализ. Пер. с нем. М.: Статистика, 1980.- 398 с.

52. Исмаилова С.А., Арипджанов К.А., Ниязов Э.Л. Аминокислотный спектр крови при переношенной беременности и нефропатии// Акуш. и гин.- 1973.- № 6.- С. 68-69.

53. Калинина Л.В., Гусев Е.И. Наследственные болезни метаболизма и факоматозы. М.: Медицина, 1981.-248с.

54. Козаренко Т.Д., Зуев С.Н., Муляр Н.Ф. Ионообменная хроматография аминокислот (теоретические основы и практика).- Новосибирск: Наука. Сибирское отделение, 1981. 159 с.

55. Кон P.M., Рот К.С. Ранняя диагностика болезней обмена веществ. М.: Медицина, 1986.- С. 332-337.

56. Корабелыцикова Н.И. Содержание свободных аминокислот в сыворотке крови и экскреции их с мочой у здоровых женщин при нормально протекающей беременности// Акушерство и гинекология. 1970. -№5.-С. 58-61.

57. Корабелыцикова Н.И. К вопросу о расстройствах обмена аминокислот сыворотки крови у беременных женщин с ревматическими пороками сердца// Вопр. ревматизма.-1970.-№ 4.- С. 43-48.

58. Корабелыцикова Н.И. Ревматизм, его течение и лечение у беременных женщин в свете изучения некоторых показателей обмена. Авто-реф. дис. на соискан. уч. степ. док. мед. наук.- М., 1972.- 35 с.

59. Королева И.А. Обмен аминокислот при фенилпировиноградной олигофрении и болезни Дауна. Автореф. дис. на соискание уч. степ. канд. мед. наук. -М., 1968. 15 с.

60. Краснопольская К.Д. Генетические основы и методы биохимической диагностики наследственных болезней обмена веществ. Автореф. дис. на соискан. уч. степ. док. биол. наук.- М., 1985.- 53 с.

61. Краснопольская К.Д., Вестинецкая Л.И., Лебедев Б.В. Тест Гат-ри для определения фенилаланина в крови//Лаб. дело. 1971.- № 11.-С. 687-689.

62. Куприянова Е.М., Степанов A.A. Аминокислотный и белковый состав сыворотки крови при воспалении половых органов// Акуш. и гин.-1974,-№2.-С. 64-65.

63. Кучеренко Н.Е. Биохимия: учебное пособие.- Киев: Выща школа, 1988. -434 с.

64. Лакин Г.Ф. Биометрия. М.: Высшая школа, 1990. - 352 с.

65. Лабораторные методы исследования в клинике: справочник под ред. проф. В.В. Меньшикова. М.: Медицина, 1987, - С. 224.

66. Лаптев А.В., Честков В.В. Динамика свойств фенилаланингид-роксилазы печени в эмбриогенезе человека// Онтогенез. 1990. - Т.21. -№2.-С. 138-144.

67. Лебедев Б.В. Фенилкетонурия у детей. Автореф. дис. на соискание уч. степ. док. мед. наук. М., 1970.- 47 с.

68. Лебедев Б.В., Блюмина М.Г. Фенилкетонурия у детей. М.: Медицина, 1972. -152 с.

69. Левин Ф.Б. Экспресс-метод определения содержания фенилала-нина в крови// Вопр. мед. химии.-1970. Т. 16, № 3.- С. 326-329.

70. Лекции по медицинской генетике/ Под ред. Л.А. Прокофьевой -Бельговской, В.П. Эфроимсона. М.: Медицина, 1974.- С. 57-64.

71. Ленинджер А. Основы биохимии: В 3-х т. Т.1. Пер. с англ. М.: Мир, 1985.-368 с.

72. Лильин Е.Т., Богомазов Е.А., Гофман-Кадошников П.Б. Генетика для врачей. М.: Медицина, 1990. -254 с.

73. Лифанова В.М. Белки и некоторые свободные аминокислоты сыворотки крови при нормально протекающей беременности и при позднем токсикозе беременных. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. мед. наук. Омск, 1966.- 13 с.

74. Макаров И.О. Функциональное состояние системы мать -плацента плод при гестозе. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. док. мед. наук.-М., 1988.-48с.

75. Максимов Г.К., Спицин А.Н. Статистическое моделирование многомерных систем в медицине. М.: Медицина, 1981. -144 с.

76. Мандель И.Д. Кластерный анализ. М.: Финансы и статистика, 1986.-176 с.

77. Маринчева Г.С., Гаврилов В.И. Умственная отсталость при наследственных болезнях. М.: Медицина, 1988. - С. 147-151.

78. Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: В 2-х томах. Т. 1. Пер. с англ. М.: Мир, 1993. - 415 с.

79. Марри Р., Греннер Д., Мейес П., Родуэлл В. Биохимия человека: В 2-х томах. Т. 2. Пер. с англ. М.: Мир, 1993. - 384 с.

80. Мецлер Д. Биохимия: химические реакции в живой клетке. В 3-х томах. Пер. с англ. Под ред. Браунштейна А.Е., Гинодмана Л.М., Северина Е.С.- М.: Мир. 1980. -Т.З. - 488 с.

81. Мурзабаева С.Ш. Фенилкетонурия в республике Башкоркостан (клинико-эпидемиологическое и молекулярно-генетическое изучение). Ав-тореф. дис. на соискание уч. степ. канд. мед. наук.- Пермь, 1997.- 20 с.

82. Мусил Я. Основы биохимии патологических процессов/ Пер. с чеш. В.В. Язвикова. М.: Медицина, 1985. - 430 с.

83. Мухамеджанов Э.К. Влияние различной обеспеченности организма белком и незаменимыми аминокислотами на пул свободных аминокислот крови и тканей// Вопр. питания.-1988.-№ 2.- С. 27-32.

84. Наследственные болезни при беременности: Пер. с англ./ Под ред. Д.Д. Шульмана, Д.Л. Симпсона М.: Медицина, 1985.- 512 с.

85. Наследственная патология человека: В 2-х томах. Под. общ. ред. Ю.Е. Вельтищева, Н.П. Бочкова., Т. 1.- М. 1992. 276 с.

86. Нарзыкулова С.А. Содержание свободных аминокислот в сыворотке крови беременных с болезнью Боткина// Акуш. и гин.-1972. № 7. -С. 65-67.

87. Нарзыкулова С.А. Свободные аминокислоты в сыворотке крови и в моче здоровых женщин в динамике беременности.// Мед. журн. Узбекистана 1972. № 6. - С. 43-45.

88. Нетахата Ж.Н., Ляпун С.Н. Показатели аминокислотного обмена при патологии внутренних органов (обзор литературы) // Советская медицина.- 1973. № 3. - С. 38-43.

89. Одай Д. Молекулярные основы фенотипической вариабельности при фенилкетонурии у детей. Автореф. на соискан. уч. степ. канд. биол. наук. М., 1994. - с. 23.

90. Основные направления борьбы с наследственными и врожденными болезнями человека., М. ВНИИМИ, В. 3.- 66 с.

91. Патологическая анатомия генома человека./ Пузырев В.П., Степанов В.А. Новосибирск: Наука, Сибирское отделение РАН, 1997. -224 с.

92. Погорелова Т.Н. Содержание свободных аминокислот в плаценте, крови пуповины и венозной крови рожениц при недонашивании беременности// Вопр. мед. химии.- 1970.- Т. 16, №4,- С. 339 342.

93. Погорелова Т.Н. Некоторые ферменты аминокислотного обмена плаценты и плодных оболочек при неосложненной беременности// Акуш. и гин.-1971. № 8,- С. 36-39.

94. Погорелова Т.Н. Распределение аминокислот в отделах головного мозга в норме и при кислородном отравлении. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. биол. наук. Ростов-на-Дону, 1966.- 15 с.

95. Покровский A.A., Сомин В.И., Екимовский А.П. О соотношении между содержанием свободных аминокислот в тканях и плазме крови при бежовой недостаточности в эксперименте// Вопр. питания.-1974.-№ 1.- С. 8-15.

96. Профилактика наследственных болезней (Сб. трудов). Москва: Высшая школа. 1987. -151 с.

97. Рахимбаева P.M. Обмен свободных аминокислот между матерью и плодом при родах// Мед. жур. Узбекистана.-1971.- № 7.-С. 56-57.

98. Сафронова Е.Е., Аненнков Г.А. Модификация метода Эйлинг для определения активности фенилаланингидроксилазы// Лаб,дело.-1982,-№5.- С. 40-43.

99. Сафронова Е.Е., Рыбакова H.A., Аненнков Г.А. Применение модифицированного метода Эйлинг для выявления гомо- и гетерозигот по гену фенилкетонурии// Вопросы медицинской химии. 1982. - № 3. -С. 70-73.

100. Семенов Н.В. Биохимические компоненты и константы жидких сред и тканей человека.-М.: Медицина, 1971.- 151 с.

101. Ситниченко Е.И. Биохимический полиморфизм фенилкетонурии. Автореф. на соискан. уч. степ. канд. биол. наук. М., 1974.-27 с.

102. Ситниченко Е.И., Блюмина М.Г. Упрощенный метод определения концентрации фенилаланина в сыворотке крови// Лаб. дело.- 1972.-№7,-С. 441-442.

103. Скачков М.М. Актуальность фенилаланингидроксилазы и обмен фенилаланина при фенилкетонурии и экзогенных поражениях печени: Автореф. на соискан. уч. степ. канд. мед. наук. М., 1975. - 30 с.

104. Сорокина Т.Т., Григорьева Н.К. Проявление гена ФКУ у гетерозиготных носителей: Тез. докл.// Всесоюзный симпозиум: Актуальные вопрос профилактики наследственных болезней. М., 1986. С. 150.

105. Сорокина Т.Т., Григорьева Н.К. Ранние проявления фенилкетонурии у детей. Тез. докл.// Всесоюзный симпозиум: Актуальные вопрос профилактики наследственных болезней. Москва, 1986.- С. 117.

106. Страйер Л. Биохимия: В 3-х т. Пер. с англ.- М.: Мир, 1985.-Т. 2.-312 с.

107. Страйер Л. Биохимия: В 3-х т. Пер. с англ.- М.: Мир, 1985.-Т. 3.-400 с.

108. Тутова И.М. О содержании свободных аминокислот в крови женщин при нормальной беременности// Акушерство и гинекология. -1970 -№ 5. С. 59-61.

109. Тютина Е.М. Содержание свободных аминокислот в крови женщин при нормальной беременности// Акуш. и гин.- 1968. N 7. - С. 2629.

110. Тютина Е.М. Содержание свободных аминокислот в крови и моче женщин при нормальной и осложненной поздним токсикозом беременности. Автореф. дис. на соиск. уч. степ. канд. мед. наук. Л.,1969.- 19 с.

111. Тютина Е.М., Тютин Л.А. Клиническое значение определения свободных аминокислот в крови и моче женщин, страдающих токсикозами второй половины беременности// Акушерство и гинекология. 1970. - № 5. -С. 62-65.

112. Урбах В.Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях. М.: Медицина, 1975. 295 с.

113. Усачева Н.Т., Лебедев Б.В. К характеристике эндогенного аминокислотного имбаланса при ФКУ// Педиатрия. 1969. - № 8. - С. 48-50.

114. Фадеева М.А., Дещекина М.Ф. Содержание свободных аминокислот в сыворотке крови и экскрекция их с мочой у детей при внутричерепной родовой травме// Вопр. охр. мат. идет. -1970. -Т. 15, № 12.-С. 55.

115. Хазан М.А., Цивин B.C., Канчук Л.А. Модификация разделения аминокислот в аминокислотном анализаторе// Лаб. дело. 1982. -№ 3. -С. 54.

116. Хашен Р., Шейх Д. Очерки по патологической биохимии. М.: Медицина, 1981 .-С. 60-61.

117. Хеншен А., Хупе К.-П., Лотшпайх Ф., Вельтер В. Высокоэффективная жидкостная хроматография в биохимии. Пер. с англ. М.: Мир, 1988.-687 с.

118. Хмелевский Ю.В., Усатенко O.K. Основные биохимические константы человека в норме и при патологии. К.: Здоров"я. - 1984. - 120 с.

119. Хош Г.М., Будыка Л.А. Аминокислотный состав крови у здоровых доношенных новорожденных// Вопр. охр. мат. и дет.-1970.- № 12-С. 54-55.

120. Хош Г.М., Будыка Л.А. Аминокислоты цельной крови у новорожденных с внутричерепной родовой травмой// Вопр. охр. мат. и дет.-1972,-Т. 17, №3.-С. 90

121. Хош Г.М., Будыка Л.А. Свободные аминокислоты цельной крови у здоровых доношенных, недоношенных и переношенных новорожденных// Вопр. охр. мат. и дет.-1971,- Т. 16, № 8.- С. 30-32.

122. Цветкова И. В. Пренатальная диагностика наследственных дефектов обмена// Итоги науки и техники. Генетика человека. -1991.- Т. 9.-С. 5-53.

123. Честков В.В., Ковалев Л.И., Шишкин С.С. и соавтр. Олигоме-ризация фенилаланингидроксилазы при ее активации фенилаланином// Вопросы медицинской химии. -1985. -Т.31. -Вып. 4. С. 60-65.

124. Честков В.В. Шишкин С.С. Генетическая гетерогенность и подходы к пренатальной диагностики фенилкетонурии// Вопросы медицинской химии. 1986. - Т. 32. - Вып. 4. - С. 7-12.

125. Чистик Ф.Д., Жильцова И.В., Веропотвелян П.Н. и соавтр. Опыт организации региональной профилактики фенилкетонурии// 2-й Все-союзн. съезд мед. генетиков. Алма-Ата, 4-6 дек., 1990, Тез. докл.- М., 1990.-С. 480.

126. Шишкин С.С., Калинин В.Н. Медицинские аспекты биохимической и молекулярной генетики. Москва.: Высшая школа - 1992. -216 с.

127. Юргелявичюс В. Массовые выявления фенижетонурии и диагностика гетерозиготного носительства в Литовской ССР. Тез. докл.// Всесоюзный симпозиум: Актуальные вопрос профилактики наследственных болезней. Москва, 1986. - С. 137.

128. Юргелявичюс В.В. Организация и результаты раннего выявления фенижетонурии в Литовской ССР и проблемы биохимического определения гетерозигот. Тез. докл.// Вопросы профилактики наследственных болезней у детей. Вильнюс, 1987.- С. 119-129.

129. Якубке Х-Д., Ешкайт X. Аминокислоты. Пептиды. Белки. Пер. с нем. М.: Мир, 1985.- 456 с.

130. Ялвисте Х.И. Содержание аминокислот сыворотки крови и мочи при позднем токсикозе беременных// Труды по медицине Тартуского Гос. Унив.- 1973. -№27, вып. 303,- С. 56-66.

131. Annenkov G.A. Phenylketonuria and hyperphenylalaninemia: clinico-genetic classification of 14 forms.// Zh. Nevropatol. Psikhiatr. 1984. -Vol. 84. - № 3. - P. 351-356.

132. Antonozzi I., Carducci C., Vestri L. Plasma amino acid values and pancreatic beta-cell function in phenylketonuria.// J. Inherit. Metab. Dis. -1987,- Vol.10.-№1,-P. 66-72.

133. Benevenga N.J., Steele R.D. Adverse effects of excessive consumption of amino acids.// Annu. Rev. Nutr.- 1984.- № 4.- P. 157-181.

134. Clemens P. C., Burmester J. G., Prankel B.H. and et. al. Phenylalanine and other amino acids in phenylketonuria.// J. Inherit. Metab. Disease. -1993.- Vol. 16, № 16,-P. 1045-1046.

135. Clemens P.C., Burmester J.G., Wiegand G. and et.al. Phenylalanine, other large neutral amino acids and RNA catabolites as markers for proteinbiosynthesis in phenylketonuria letter, comment.// Metabolism.-1993.~ Vol. 42.-№4.- P. 518-521.

136. Di Leila A.G., Marvit J., Brayton K., Woo S.L. An amino-acid substitution involved in phenylketonuria is in linkage disequilibrium with DNA haplotype 2// Nature. 1987. - Vol. 327. - № 6120. - P. 333-336.

137. Domer K., Schulze S. Refrense values for plasma amino acids in the course of pregnancy.// Z. Geburtshilfe. Perinatol.- 1993.- Vol.197.- № 3.- P. 141-143.

138. Duczynska N., Cabalska B., Nowaczewska I. and et.al. Evaluation of amino acids in plasma and amniotic fluid of women from genetic risk groups.// Probl. Med. Wieku. Rozwoj. 1990,- № 16. - P. 103-115.

139. Eisensmith R.C.; Martinez D.R.; Kuzmin A.I. and et.al. Molecular basis of phenylketonuria and a correlation between genotype and phenotype in a heterogeneous southeastern US population.// Pediatrics. 1996. - Vol.97. - №4. -P.512-516.

140. Evans S.J.; Wynne-Williams T.C.; Russell C.A. and et.al. Hyperphenylalaninaemia in parentally fed newborn babies (letter).// Lancet.1986. Vol. 2.- № 8520. - P. 1404-1405.

141. Farquhar D.L., Simpson G.K., Steven F. and et.al. Pre-conceptual dietary management for maternal phenylketonuria// Acta. Paediatr. Scand.1987. Vol. 76. - № 2. - P. 279-283.

142. Freehauf C.L.; Lezotte D.; Goodman S.L; Mc Cabe E.R. Carrier screening for phenylketonuria: comparison of two discriminant analysis procedures.// Am. J. Hum. Genet. 1984. -Vol. 36. - № 6. - P. 1180-1189.

143. Frits A., Hommes G., Editer B. Techniques in diagnostic human biochemical genetics. 1994.

144. Furesz T.C., Moe A.J., Smith C.H. Two cationic amino acid transport systems in human placental basal plasma membranes.// Am. J. Physiol.-" 1991.- Vol. 281.- № 8.- P. 246-252.

145. Gardiner R.M. Transport of amino acids across the blood-brain barrier: implications for treatment of maternal phenylketonuria.// J. Inherit. Metab. Dis. 1990. - Vol. 13. - № 4. - P. 627-633.

146. Guldberg Per., Guttler Flemming. PCR- in the diagnosis of phenylketonuria// Ann. Med. 1992. - Vol. 24. - № 3. - P. 187-190.

147. Guttler F., Lou H. Dietary problems of phenylketonuria: effect on CNS transmitters and their possible role in behaviour and neuropsychological function.// J.Inherit.Metab.Dis. -1986. -9 Supple 2. P. 169-177.

148. Guttler F.; Woo S.L. Molecular genetics of PCU.// J.Inherit.Met ab.Dis. 1986. - 9 Supple. 1. - P. 58-68.

149. Guttler F., Ledley F.D., Lidsky A.S. DiLella A.G. and et.al. Correlation between polymorphic DNA haplotypes at phenylalanine hydroxylase locus and clinical phenotypes of phenylketonuria // J.Pediatr. -1987. -Vol. 110.-№1.-P. 68-71.

150. Hanley W.B., Clarke J.T., Schoonheyt W. Maternal phenylketonuria (PKU) a review// Clin.Biochem. - 1987.- Vol. 20. - № 3. -P. 149-156.

151. Heard G.S.; Secor-McVoy J.R.; Wolf B. A screening method for biotinidase deficiency in newborns.// Clin.Chem. 1984. - Vol. 30. - № 1. -P. 125-127.

152. Hilton M. A., Sharpe J. N., Hicks L.G., Andrews B.F. A simple method for detection of heterozygous carriers of the gene for classic PNA.// J. Pediatr. 1986. - Vol. 10, № 4. - P. 601-604.

153. Hjelm M., Seakins J., Antoshechkin A. Indications of changed amino acid homeostasis in untreated and treated PKU.// Acta. Pediatr. Suppl.-1994.- №407.-P. 57-59.

154. Hoskins J.A., Holliday S.B., Greenway A.M. The metabolism of cinnamic acid by healthy and phenylketonuric adults: a kinetic study// Biomed. Mass. Spectrom.- 1984. Vol.11.- № 6.- P. 296-300.

155. Hyanek J., Bendl J., Zeman J. and et.al. Maternal hyperphenylala-ninemia in a population of healthy Czech women: 18 year"s experience with mas screening, diet therapy and metabolic monitoring// Cas. Lek. Cesk. 1996. -Vol. 135,-№2.-P. 50-53.

156. Iordan M.K., Brunner R.L., Yunt M.M., Berry H.K. Preliminary support for the oral administration of valine, isoleucine and leucine for phenylketonuria.// Dev. Med. Child. Neurol. -1985. Vol. 27. - № 1,- P. 33-39.

157. Karl P.I., Tkaczevski H., Fisher S.E. Characteristics of histidine uptake by human placental microvillous membrane vesicles.// Pediatr. Res. -1989.- Vol. 25. -№ 1. P. 19-26.

158. Kaufman S. Enzymology of the phenylalanine-hydroxylating system// Enzyme. -1987. Vol. 38. - № 1 - 4. - P. 286-295.

159. Koch R.,Friedman E.G., Wenz E. and et.al. Maternal phenylketonuria.// J.Inherit.Metab.Dis. -1986. -9 Supple 2. P. 159-168.

160. Kremenski I., Borisov I., Barov D, Katsulov A. The plasma amino acid profile of women with a normal pregnancy and in preeclampsia.// Akush. Ginekol. Sofia.- 1990,- Vol. 29,- № 6.- P. 5-9.

161. Kudo Y., Boyd C.A. Transport of amino acids by the human placenta: predicted effects thereon of maternal hyperphenylalaninaemia.// J. Inherit. Metab. Dis.-1990. Vol. 13. - №4.- P. 617-626.

162. Kudo Y., Boyd C.A. Human placental L-tyrosine transport: a comparison of brush-border and basal membrane vesicles.// J. Physiol. Lond. 1990. -№426.- P. 381-395.

163. Kwok S.C.M, Ledley F.D., DiLella A.G. and et.al. Nucleotide sequence of a full-length complementary DNA clone and amino acid sequence of Human Phenylalanine Hydroxylase// Biochemistry, 1985. №24. - P. 556-561.

164. Lehmann W.D. Progress in the identification of the heterozygoute in phenylketonuria// J. Pediatr. -1989,- Vol. 114 . -№ 6. P. 915-923.

165. Lellis W.A., Speer V.C. Aromatic amino acid requirement of the lactating sow.// J. Anim. Sci. 1985. - Vol. 61.- № 6. - P. 1448-1453.

166. Levy H. L. Maternal phenylketonuria. Review with emphasis on pathogenesis// Enzyme. 1987. - V. 38.- № 1 - 4. - P. 312-320.

167. Levy H.L., Lobbregt D., Sanaricq C., Snyderman S.E. Comparison of phenylketonuric and nonphenylketonuric sibs from untreated pregnancies in a mother with phenylketonuria// Amer. J. Med. Genet. 1992. - V. 44. - № 4,-P. 439-472.

168. Levy H.L.; Lobbregt D.; Barnes P.D.; Poussaint T.Y. Maternal phenylketonuria: magnetic resonanse imaging of the brain in offspring.// J. Pediatr 1996. Vol. 128.- № 6,- P. 770-775.

169. Lewis S.A., Lyon I.C., Elliott R.B. Outcome of pregnancy in the rat with mild hyperphenylalaninaemia: implications for the management of «human maternal PKU».// J. Inherit. Metab. Dis. 1985. - Vol. 8.- №3.-P. 113-117.

170. Lidsky A.S.; Robson K.J.; Thirumalachary C. and et.al.

171. The PKU locus in man is on chromosome 12.// Am. J. Hum. Genet. 1984.- Vol. 36. -№3. -P. 527-533.

172. Loo Y.H., Hyde K.R., Lin F.H., Wisniewski H.M. Celebral biochemical abnormalities in experimental maternal phenylketonuria: gangliosides and sialoglycoproteins.// Life Sci.- 1985. Vol.37. - №22. - P. 2099-2109.

173. Lou H.C., Lykkelund C., Gerdes A.M. and et.al. Increased vigilance and dopamine synthesis by large doses of tyrosine or phenylalanine restriction in phenylketonuria.// Acta. Paediatr. Scand. 1987. - Vol. 76. -№4. - P. 560-565.

174. Mac Mahon R.A., Erampton R.J., Yardley R.W. Effect on the fetus of infusing a commercial amino acid preparation into a pregnant sheep.// Biol. Neonate. -1990.- Vol.57. № 3 - 4. - P. 231-237.

175. Mary A., Hilton Ph.D., Lee G. and et.al. A simple method for detection of hetrozygous carries of the gene for classic phenylketonuria.// The Journ. of Pediatrics. 1986. - Vol. 109. - №4. - P. 601-604.

176. Matalon R., Michals K. Phenylketonuria: screening, treatment and maternal PKU.// Clin. Biochem. 1991. - Vol. 24. - №4. - P. 337-342.

177. Morris N.H., Burston D., Ramsay B. Free amino acid concentrations in normal and abnormal third trimester placental villi.// Eur. J. Clin. Invest.- 1995.-№10.-P. 796-798.

178. Naylor E.W„ Ennis D., Davidson A.G. and et.al. Guanosine triphosphate cyclohydrolase I deficiency: early diagnosis by routine urine pteridine screening// Pediatrics. 1987. -Vol. 79. - №.3. - P. 374 - 378.

179. Niwa T. Mass spectrometry in disorders of organic acid metabolism.// Clin. Chim. Acta. 1995,- № 9 -10. - P. 241-242; 293-384.

180. Okano Y.; Chow I.Z.; Isshiki G. and et.al. Effects of phenylalanine loading on protein synthesis in the fetal heart and brain of rat: an experimental approach to maternal phenylketonuria.// J. Inherit. Metab. Dis. -1986,-Vol.9.-№1.-P. 15-24.

181. Okano Y.; Isshiki G. Newborn mass screening and molecular genetics of phenylketonuria in east Asia.// Southeast. Asia. J. Trop. Med. Public. Health. -1995. -Vol. 26 Suppl 1. P. 123-129.

182. Ponzone A., Guardamagna O., Spada M. and et.al. Hyperphenylalaninemia and pterin metabolism in serum and erythrocytes.// Clin. Chim. Acta. 1993. - Vol. 216.- № 1 - 2. - P. 63-71.

183. Pueschel S.M., Boylan J.M., Jackson B.T. and et.al. Fetomaternal placental transfer mechanisms of aromatic amino acids in Macaca mulatta.// J. Reprod. Med. 1985. - Vol. 30,- № 11. - P. 879-883.

184. Rey F.; Munnich A., Lyonnet S.; Rey J. Classification and heterogeneity of hyperphenylalaninemias linked to a phenylalanine hydroxylase deficiency// Arch. Fr. Pediatr. 1987. - Vol. 44. - Supp 11.- P. 639642.

185. Rouse B., Lockhart L., Matalon R. and et.al. Maternal phenylketonuria pregnancy outcome: a formations// J. Inherit. Metab. Disease.-1990. Vol. 13. - № 3. - P. 289-291.

186. Rudy J.L., Rutledge J.C., Lewis S.L. Phenylalanine and tyrosine in serum and eluates from dried blood spots as determined by reversed-phase liquid chromatography.// Clin. Chem. 1987. - Vol. 33,- № 7.- P. 1152 - 1154.

187. Saraiva J.M., Seakins J.W.T., Smith I. Plasma phenylalanine and tyrosine levels revisited in heterozygotes for hyperphenylalaninemia// J. Inherit. Metab. Disease. 1993. - Vol.16. - №1. - P. 105-109.

188. Schroter J.; Schott K.J.; Purtill M.A.; Neuhoff V. Lysosomal protein degradation in experimental hyperphenylalaninaemia.// J. Inherit. Metab. Dis. 1986. - Vol. 9. - № 3. -P. 273 - 282.

189. Smith I., Howells D.W., Hyland K. Pteridines and mono-amines: relevance to neurological damage.// Postgrad. Med. J. 1986. - Vol. 62, - № 724.-P. 113-123.

190. Speer A., Bollman R., Michel A. and et.al. Prenatal diagnosis of classical phenylketonuria by linked restriction fragment length polymorphism analysis// Prenat. Diagn. 1986. - Vol. 6. - № 6. - P. 447 - 450.

191. Speer V.C., Kile D.L., Trew J.C. Estimation of the isoleucine and aromatic amino acid requirements of pregnant swine.// J. Anim. Sci.- 1990. -Vol. 68. № 8.- P. 2394 - 2399.

192. Stegink L.D., Wolf-Novak L.C., Filer L.J. and et.al. Aspartame-sweetened beverage: effect on plasma amino acid concentrations in normal adults and adults heterozygous for phenylketonuria.// J. Nutr.- 1987.- Vol. 117.-№11.-P. 1989- 1995.

193. Svensson E., Iselins L., Hagenfeldt L. Severity of mutation in the phenylalaninehydroxylase gene influence phenylalanine metabolism in phenylketonuria and hyperphenylalaninemia heterozygotes//J/ Inherit. Metab. Dis.-1994. Vol. 17. - № 2 - P. 215- 222.

194. Teerlink T., P. A. M. Van Leeuwen, Huudijk A. Plasma amino acids determinated by liquid chromatography within 17 minutes.// Clin. Chem. -1994.- Vol. 40.- № 2. P. 245 - 249.

195. Trefz F.K., Burgard P., Konig T. and et.al. Genotype-phenotype correlations in phenylketonuria.// Clin. Chim. Acta.-1993.- Vol.217.- № 1. P. 15-21.

196. Tushman M., Fisch R.O., Ramnaraine M.L., Krivit W. Acidic metabolites of phenylalanine in plasma of phenylketonurics.// Biochem. Med.-1985. Vol.34.- № 2.- P. 203 - 206.

197. Van-Winkle L.J., Mann D.F., Campione A.L., Parrington B.H. Transport of benzenoid amino acids by system T and four broad scope systems in preimplantation mouse conceptuses.//Biochim. Biophys. Acta.- 1990. Vol. 1027,- №3.-P. 268-277.

198. Vina J.R., Puertes I.R., Rodriguez A. and et.al. Effect of fasting on amino acid metabolism by lactating mammary gland: studies in women and rats.// J. Nutr. 1987.- Vol. 117,- № 3.- P .533 - 538.

199. Vogel F. Clinical consequences of heterozygosity for autosomal-recessive diseases// Clin.Genet. 1984. -Vol. 25. - № 5.- P. 381-415.

200. Vorhees C.V., Berry H.K. Branched chain amino acids improve complex maze learning in rat offspring prentally exposed to hyperphenylalaninemia: implications for maternal phenylketonuria.// Pediatr. Res. 1989.- Vol. 25,- №6.-P. 568 - 572.164

201. Walter J.H., Tyfield L.A., Holton J.B., Johnson C. Biochemical control, genetic analysis and magnetic resonance imaging in patients with phenylketonuria.// Eur. J. Pediatr. -1993.- Vol. 152. -№ 10,- P. 822 827.

202. Wengler S.L., Vieira P.W., Breck J.M., Steele M.W. Relative reliability of three different discriminant analysis methods for detecting PKU gene carriers// Clin.Genet. -1986. Vol. 30. - № 1. - P. 38 - 40.

203. Wyse A.T., Sarkis J.J., Cunha-Filho J.S. and et. al. Effect of phenylalanine and its metabolites on ATP diphosphohydrolase activity in synapto-somes from rat celebral cortex.// Neurochem. Res. -1994.- Vol. 19.- № 9.-P. 1175-1180.